Transient abnormal myclopoiesis (TAM) is a leukemoid reaction occurring occasionally in Down syndrome (DS) newborn infants. It has been hypothesized that "disomic homozygosity" in 21-trisomic cells plays an important-role in the genesis of TAM,and the putative TAM gene was suggested to be mapped at a 21q11 region. We encountered a DS-associated TAM infant with a 47, XY,inv (21) (q11.1q22.13), +inv (21) (q11.1q22.13) karyotype. Based on another presumption that in this patient, the putative TAM gene is disrupted by the break, we tried to isolate a breakpoint DNA.FISH analysis with cosmid clones corresponding to various STS markers mapped at around 21q11.1-q11.2, we confirmed that the proximal breakpoint of the inv (21) was located between two STSs, G51E07 and D21S215, the latter locus being consistent to the previous tentative mapping. After construction of a cosmid contig encompassing between the 2 markers, we have isolated a cosmid clone corresponding to the proximal breakpoint of the inversion. This breakpoint was located nearby a previously identified duplicated-region that is homologous to the sequence at 21q22.1. The isolated cosmid clone is useful for analysis of other TAM patients and for a search for a transcript at or flanking the breakpoint.1.逆位切断点を含むYACのFISH解析:SISマーカー(G51E07,GA2G07)領域をカバーする5個のCEPH-YAC由来のコスミドサブクローンを用い患者の逆位染色体におけるFISH解析を行なった結果,YAC-330H1とYAC-73F6が切断点に近接し,切断点はG51E07とD21S215の間に存在することが判明した。2.逆位領域のコスミドコンティグ作製:73F6と330H1 YAC由来コミスドクローンをサザン解析およびEcoRI指紋解析し、I〜IVのクラスターにグループ化した。クラスターIとIIの間のギャップを埋めるため、コスミドアッセンブリー,コスミドポケット,21番染色体特異的コスミドライブラリーなどから単離したクローンを用いて,G51E07〜D21S215間のコスミドコンティグ(約150kb)を構築した。各コスミドのFISH解析およびサザン解析で患者逆位の近位切断点に一致するクローン(Q62E11)を単離した。患者の切断点(21q11.1)は21q22.1領域との相同性が従来同定されているホモロジー重複領域に近接していた。今回単離したクローンは,切断点に一致または近接するTAM遺伝子転写物の探索に有用であり、コスミドのサブクローニングおよびエクソントラッピングで転写物を単離する予定である。