To Clarify the role of the excreted extracellular enzymes during long-term incubation in a pulp biobleaching system with white-rot fungi, we have developed a cultivation system using a membrane filter which can prevent the direct contact between hyphae and kraft pulp, but allows extracellular enzymes to attack the kraft pulp. Phanerochaete sordida YK-624 brightened the pulp 21.4points to 54.0% brightness after 5-day in vitro treatment, which was significantly higher than phanerochaete chrysosporium and Coriolus versicolor did during 7-day treatment. These results indicate that cell-free, membrane-filtered components from the in vitro bleaching system are capable of delignifying unbleached kraft pulp. Obvious candidates for filterable reagents capable of delignifying and bleaching kraft pulp are peroxidase and phenoloxidase proteins. Secreted manganese peroxidase activity in the filterable components was substantial during the fungus YK-624 in vitro bleaching. A positive correlation between the level of manganese peroxidase and brightening of the pulp was observed.これらの菌株により酵素漂白が可能かどうか検討するために、メンブランフィルターを用いた培養法を考案した。これは菌糸とクラフトパルプが直接接触することなしに、菌体外酵素系のみがパルプに作用できる培養系である。このin vitro処理により、YK-624株は、5日間の処理で白色度を約22ポイント上昇させ、既知菌株であるカワラタケやPhanerochaete chrysosporiumに比べて顕著な効果を示した。この培養法における菌体外リグニン分解関連酵素活性を測定した結果、リグニンペルオキシダーゼ,フェノールオキシダーゼ活性は、ほとんどみられず、マンガンペルオキシダーゼ活性が顕著であり、白色度の上昇と明確な関連性が認められた。即ち、本研究により、白色腐朽菌によるクラフトパルプの白色化に寄与しているのは、マンガンペルオキシダーゼであることが明らかとなり、クラフトパルプの酵素漂白プロセス確立のための基礎資料を得ることができた。