Monoclinal antibodies HNK-1 and VC1.1 were shown to outline selectively a subpopulation of GABAergic neurons containing a specific calcium-binding protein parvalbumin (PV) in the adult rat parietal cortex, using pre- and post-embedding immunocytochemistry at light microscopic level. About 98% of HNK-1 stained cells in the rat parietal cortex were PV immunoreactive. About 95% of HNK-1 immunoreactive cells were also shown to be stained with a lectin, Vicia villosa agglutinin (VVA), with a specific affinity for terminal N-acetylgalactosamine, Previously shown to selectively stain a population of PV-containing GABAergic neurons in this region. Furthermore it was shown that almost all of HNK-1 immunoreactive cells were also stained with a monoclinal antibody 3B3, which has been established to be specific to chondroitin sulfate proteoglycan and was shown in the present study to selectively label a population of PV-immunoreative neurons in the adult rat parietal cortex. In addition, a direct
… Morecomparison of two monoclonal antibodies HNK-1 and VC1.1 revealed that both were identical in their staining properties and that they defined the same subset of PV-containing GABAergic neurons in the rat rietal cortex. In the rodent cortex PV-containing neurons might be a distinctive subpopulation of GABAergic neurons, and, furthermore, specific subsets of cerebral PV-containing GABAergic neurons might be considered to have a particular microenvironment characterized by those molecular probes.1)単クロ-ン抗体VCI.l及びHNKーlが、GABAニュ-ロンのサブポピュレ-ションの1つであるカルシウム結合蛋白パ-ブアルブミン含有神経細胞の一部を特異的に認識していることの証明。VC1.1は、ネコの視覚野をを抗原として得られた単クロ-ン抗体である。一方、HNKー1は、ヒトT cell系培養細胞の膜抗原としてつくられた単クロ-ン抗体であり、グルクロン酸と硫酸基を含有した糖鎖が抗原基であるとされている。更に、重要なことはこのHNKー1抗原基が形態形成上重要な分子である細胞接着因子(NCAM,MAG等)にかなり特異的に発現しているとされていることである。この両単クロ-ン抗体とも、成体ラット、マウスで中枢神経系かなり限られたニュ-ロン群の細胞膜近傍を認識することが報告されている。特に、大脳皮質では主に、いわゆるGABA性非錐体細胞の一部を認識するとされている。我々は、従来の大脳皮質GABA系の免疫細胞化学的解析により、GABAニュ-ロンを(1)カルシウム結合蛋白パ-ブアルブミンを含有したGABAニュ-ロン、(2)他の神経活性物質を含有したGABAニュ-ロン、(3)その他の三つのサブポピュレ-ションに分類した。これは、いわばGABAニュ-ロン細胞質に含有される物質による化学的分類である。では、細胞表面を認識するVC1.1及びHNKー1はこのような分類とはどのように関係しているのであろうか。我々がラット大脳皮質1次体性感覚野で検討したところ、VC1.1、HNKー1とも、上記のGABAニュ-ロンのサブポピュレ-ションであるパ-ブアルブミン含有GABAニュ-ロンに特異的であることが判明した。更に、VC1.1とHNKー1は、大脳皮質においては全く同一グル-プのニュ-ロンを認識していることが判明した。このことはパ-ブアルブミン含有GABAニュ-ロンの一部は、細胞表面近傍に特異な微小環境を有していることを示している。2)ステレオロジ-による定量的解析 プラスチック包埋した大脳皮質から連続した0.5μmの準超薄切片を作成し切片間距離として3μmを選びdisectorによる解析を行ない、GABAニュ-ロンがニュ-ロンの20%を占め、その約半数(10%)がパ-ブアルブミン含有GABAニュ-ロンであることを明らかにした。 Less