Mulberry plant, a woody feedcrop for the silkworm, is an attractive species for molecular framing since the plant have superior agronomical characteristics. Transgenic mulberry clone, if produced, may provide a farming system for the production of valuable biomolecules. To realize this target, it is essential to establish the methods for (1) plantlet regeneration from explant tissues and (2) gene delivery into target tissue. High frequency of shoot regeneration was achieved by 2 step-culture system consisting of seedling culture for obtaining leaf explants and leaf culture for inducing shoot organogenesis. A critical factor in both cultures was medium composition in which 2, 3, 5-triiodobenzoic acid and cytokinin such as 6-benzylaminopurin and thidiazuron was included. For efficient gene delivery into regenerable leaf tissue, various bombardment conditions were optimized using a particle inflow gun device : gold particle as microprojectile, bombardment frequency, preculture period and conditioning treatment of target tissue. When the optimal conditions were combined, 200-300 gene expressing-cells per cmィイD12ィエD1 tissue were detected. Based on these results, it is possible to generate transgenic mulberry clones.1.個体再生糸:2段階培養による「新規なクワ高頻度個体再生糸」を開発した。両培養段階で使用する培地にサイトカイニンと抗オーキシン剤を添加することが必須条件であることを見出し、葉底部組織から高率に不定芽が形成され、野外でも生育しうる完全な植物体が再生した。不定芽の起源細胞は葉底部中助組織のEpidermal cellまたはSub-epidermal cellであり、カルスを経由することなく直接的に器官分化することを明らかにした。2.遺伝子導入系:(1)遺伝子銃による導入一葉底部組織を標的組織として、Particle inflow gunによる外来遺伝子の導入条件を検討した。外来遺伝子として、β-グルクロニターゼ遺伝子がコードされているプラスミド(pBI221)を用いた。プラスミドDNAでコートされた金粒子のサイズ・噴射速度・撃ち込み回数、噴射された金粒子の標的組織上での衝撃圧力、標的組織の前培養期間と化学的・物理的処理条件などを最適化することによって、高い導入効率が得られた。この条件設定により、形質転換体の取得確率が著しく向上した。(2)アグロバクテリウムを介した導入ーT-DNA領域にβ-グルクロニターゼ及びハイグロマイシン耐性遺伝子をコードしたアグロバクテリウムを接種して、形質転換体の作出条件を検討した。葉底部組織をポリビニルピロリドンなどで前処理することにより、菌の感受性が高められ感染効率が向上した。その結果、部分的に形質転換細胞を含むキメラ不定芽を選抜することができた。(3)エレクトロポレーションによる導入一種々の電気的条件を最適化することにより、クワ培養細胞から得られたプロトプラスト内で外来遺伝子が発現していることを確認した。